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醫用離心機常用的離心方法

作者:admin??發布時間:2017-12-23

醫用離心機常用的離心方法


一、差速離心法(又稱分步離心法) 采用不同的離心速度和離心時間,使沉降速度不同的顆粒分步離心的方法,稱為差速離心。操作時,將含有兩種不同顆粒的混懸液,以常速離心,使大的顆粒下沉,將上清液傾倒于另一離心管中,再加大離心力,離心一定時間,分離小的顆粒,反復多次分離,達到分離目的。差速離心主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。差速離心法的優點是:操作簡單,離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開,并可使用容量較大的角式轉子;分離時間短、重復性高;樣品處理量大。缺點是:分辨率有限、分離效果差,沉淀系數在同一個數量級內的各種粒子不容易分開,不能一次得到純顆粒;壁效應嚴重,特別是當顆粒很大或濃度很高時,在離心管一側會出現沉淀;顆粒被擠壓,離心力過大、離心時間過長會使顆粒變形、聚集而失活。

二、速率區帶離心法:是根據分離的粒子在離心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,離心后具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內形成幾條分開的樣品區帶,達到彼此分離的目的。臨床常使用的分離液是Ficoll、Percoll及蔗糖。把靜脈血中單個核細胞分離出來,前一種分離液將血液中單個核細胞(淋巴細胞和單核細胞)分為一個層,同時提出。而Percoll分離液將血中淋巴細胞和單核細胞分為二個梯度層,分別提取。后者分離效果優于前者,但操作繁瑣。